疣迪搽劑組分高純鬼臼毒素制備新工藝

溫普紅

(寶雞文理學院化學化工系，陜西寶雞 721007)

 

    鬼臼毒素是皮膚科一線用藥疣迪搽劑的主要成分之一，它來自中藥桃兒七，后者是小檗科植物桃兒七的干燥根及根莖，其性溫、味苦，具有除風濕、利氣血、止咳等功效，常用于治療風濕關節痛、趺打損傷、風寒咳嗽、鐵棒錘中毒等癥。從成分上看，木脂素的主要成分為鬼臼毒素， 其次為α-盾葉鬼臼素，盾葉鬼臼素，4''''-去甲鬼臼毒素，去氧鬼臼毒素，4''''-去甲去氧鬼臼毒素，異鬼臼苦酮，錫金鬼臼毒素和木脂素甙等。近年來的研究發現，鬼臼毒素除可用于治療尖銳濕疣、抑制皰疹病毒外，它還是半合成抗癌藥物依托泊苷(VP-16) 的主要原料。因此對制備高純鬼臼毒素的工藝有重大的現實意義。

    筆者利用鬼臼毒素能形成溶劑加合物的特性，采用二步結晶法，使粗品的純化步驟大為減化，在不用柱層析分離法的條件下，成功地制備出了質量分數大于96％的鬼臼毒素精品，總產率為1.7％。現簡述如下：

    儀器和試劑
    R-201型旋轉蒸發器；SHB-B水循環多用真空泵；HH-4數顯恒溫水浴鍋；LC-4A高效液相色譜儀；X4型顯微熔點測定儀。

    桃兒七根莖(產自陜西太白)；鬼臼毒素對照品[w(鬼臼毒素)=98.5％，中國藥品生物制品檢定所提供]；工業甲醇；苯、無水乙醇、活性炭均為分析純。

    鬼臼毒素的提取分離與純化
    提取分離：稱取 100.Og干燥的、已粉碎的桃兒七根，用甲醇在7O℃回流提取3次，每次2h；合并提取液并濃縮成紅棕色浸膏后，再用苯在 80℃回流提取2次，每次2h。過濾，所得濾液被濃縮至一定體積，放置結晶，過濾后得到2.5g淺黃色的粗品。

    純化：將粗品用無水乙醇溶解，加入活性炭，煮沸20min脫色。過濾后，將濾液濃縮成樹脂狀,加苯懸浮溶解，棄去不易溶解的黃棕色雜質，濾液濃縮結晶，重復上述純化操作 2次。所得晶體在苯中反復重結晶直到在器皿壁上觀察不到黃色析出物，用苯-乙醇[V(苯)：V(乙醇)=2：1]為溶劑，將晶體在80℃加熱溶解，冷卻后，析出白色針晶。將其在125℃的烘箱中烘2h，脫去溶劑分子后，即得鬼臼毒素精品。

    樣品的測定
    應用紫外分光光度法、薄層掃描法、熒光光度法和高效液相色譜法測定植物中鬼臼毒素的方法已有報道。本項目組采用 HPLC法測定樣品中的鬼臼毒素，此部分工作由陜西省中醫藥研究院承擔。

    結論
    桃兒七的甲醇提取物，經苯在80℃回流提取，活性炭脫色，除去大部分雜質后，利用鬼臼毒紊形成溶劑加合物的特性，采用二步結晶法，經晶型轉化，脫去溶劑分子后，即可制得質量分數不低于96％的鬼臼毒素精品。該法與柱層析法相比，雖然產品中鬼臼毒素的含量略低，但由于不需要特殊的設備且操作簡便，適合于大批量生產，因此，在提高產量、降低生產成本方面具有較強的優勢。

(收稿日期：2001-07-26)